Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞
簡要描述：
Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)用的菌株，MATα型，能直接轉化質(zhì)粒進行文庫篩選。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。
產(chǎn)品時間：2024-03-20
打印當前頁Y1HGold Chemically Competent Cell
酵母菌化學感受態(tài)細胞
溫馨提示
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產(chǎn)品關鍵詞：
GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)；Y1HGold；pAbAi；pGADT7；Ar Qual；X-α-Gal ；Aureobasidin A （AbA）；金擔子素；
產(chǎn)品訂購：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
MF2362-1000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞 | 10×100μl | 290 |
MF2362-5000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞 | 50×100μl | 1320 |
產(chǎn)品組分：
組分編號 | 組分名稱 | 保存 | 貨號（規(guī)格） | |
MF2362-1000UL | MF2362-5000UL | |||
MF2362-A | Y1HGold Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2362-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2362-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2362-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
產(chǎn)品描述
酵母單雜交是在酵母雙雜交的基礎上發(fā)展起來，不同于雙雜交用來研究蛋白-蛋白間的相互作用，單雜交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。
Y1HGold是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)用的菌株，MATα型，能直接轉化質(zhì)粒進行文庫篩選。
Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。前者篩選標志為Ura，用于表達pBait-AbAi構建子（通過將bait-DNA 單拷貝或串聯(lián)重復序列克隆到pAbAi載體所得）；后者篩選標志為Leu，用于表達GAL4 AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)的工作原理在于：基因組整合有pBait-AbAi的酵母報告菌株，當誘捕蛋白（prey）結合到誘餌序列（bait-DNA），GAL4 AD會激活AUR1-C報告基因的表達，這一表達使得細胞能夠在含篩選抗生素金擔子素（Aureobasidin A，AbA）的培養(yǎng)基上生長。與傳統(tǒng)的營養(yǎng)缺陷報告基因相比，AUR1-C（AbAr）在很低濃度（100-200 ng/ml）下即可以有效殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆生長。這一優(yōu)勢也可降低酵母單雜交假陽性發(fā)生的概率。
本品為經(jīng)特殊工藝制備的Y1HGold酵母菌化學感受態(tài)細胞，用pGADT7質(zhì)粒檢測轉化效率＞104cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存三個月。
基因型
MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1
使用方法
- 取100 µl冰上融化的Y1HGold化學感受態(tài)細胞，依次加入預冷的目的質(zhì)粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重復一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時翻轉6-8次混勻）。
- 之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時翻轉6-8次混勻）。
- 5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH2O重懸沉淀，離心30s棄上清。
- 用50 µl ddH2O重懸，涂板，放入恒溫培養(yǎng)箱29℃培養(yǎng)48-96 h。
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MS6303-350G | YPDA Agar Medium YPDA瓊脂培養(yǎng)基 | 350g |
MS6304-250G | YPDA Medium YPDA液體培養(yǎng)基 | 250g |
MS6311-467G | Minimal SD Agar Base SD瓊脂基礎培養(yǎng)基 | 467g |
MS6312-267G | Minimal SD Base SD基礎培養(yǎng)基 | 267g |
MS6317-10G | DO Supplement -Leu | 10g |
MS6320-10G | DO Supplement -His/-Leu | 10g |
MS6334-10G | DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | 10g |
MS6342-10G | DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | 10g |
MS0002-1ML | Aureobasidin A (AbA) 金擔子素A（1 mg/ml） | 1ml |
MF2501-200T | Yeast Transformation Kit 酵母轉化試劑盒 | 200T |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞
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